На cтраницу второго семестра

Работа с программой BLAST

  1. Поиск белка по его последовательности

    На сервере NCBI - http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/ - был проведён поиск последовательности моего белка программой BLASTP в банке swissprot.

    В выдаче программы порядковый номер 1 Score=853 bits (2203) E Value=0.0 Поиск был повторён с той же входной последовательностю. В качестве банка был указан pdb. Для первой находки в списке pdb-код 1L8Q, идентификатор цепей A, Score= 199 bits (507), E-Value=8e-52, Identities=129/324 (39%). Начало и конец выравнивания во входной последовательности соответственно 132 и 455, в находке 4 и 309.

    В результате поиска последовательности в банке SwissProt было выдано большее количество результатов, чем во втором случае (и с большей скоростью). Это можно объяснить тем, что не для всех последовательностей известна третичная структура.

  2. Поиск белка по его гомологу

    Был проведён поиск в банке swissprot программой BLASTP. На входе была подана последовательность из файла secondprot.fasta. Белок DNAA_ECOLI в списке оказался 10-м. E-Value=0.0. Score 640 bits (1674). Identities = 322/466 (69%). Начало и конец выравнивания во входной последовательности соответственно 1 и 453, в находке 1 и 466.

    Первый белок в списке оказался тем, чья последовательность была подана на входе.

  3. Поиск белка по фрагментам его последовательности

    Был проведён поиск в банке swissprot программой BLASTP. На входе была подана последовательность из файла thirdprot.fasta.Порядковый номер моего белка 3.E-Value 5e-06. Score = 48.1 bits (113). Identities 20/20 (100%). Начало и конец выравнивания во входной последовательности соответственно 1 и 20, в находке 41 и 60.

    Белок DNAA_ECOLI оказался в списке третьим. Хотя на входе была подана последовательность состоящая из вырезанных аминокислот моего белка. Это можно объяснить тем, что была взята слишком короткая последовательность. Для того, чтобы порядковый номер был первым надо взять более длинную последовательность.

  4. Разные пользовательские интерфейсы BLAST

    Был проведён поиск последовательности белка DNAA_ECOLI при использовании программы BLASTP на сервере EBI:http://www.ebi.ac.uk/blastall/. Было найдено 50 последовательностей. Порядковый номер DNAA_ECOLI первый. E-Value 0.0. Score 2390. Identity 100%. Также поиск был осуществлён на сервере пастеровского институтаhttp://bioweb.pasteur.fr/seqanal/interfaces/blast2-simple.html . Результат было предложено получить по почте.Приятно было обнаружить письмо с результатами выравнивания у себя на почте.

  5. Является ли BLAST инструментом для поиска ортологов?

    С помощью программы BLASTP был проведён поиск по банку данных Swiss-Prot для репрессора рибозного оперона RbsR из Bacillus subtilis. В данном задании ортологами являются последовательности, в названии которых стоит RbsR. В результате был получен список:

     
    gi|2851638|sp|P36944|RBSR_BACSU  Ribose operon repressor            610    2e-174
    gi|20139764|sp|Q9K6K2|RBSR_BACHD  Ribose operon repressor           254    3e-67 
    gi|20139702|sp|Q9CF41|RBSR_LACLA  Ribose operon repressor           241    2e-63 
    gi|1173387|sp|P43472|SCRR_PEDPE  Sucrose operon repressor (Scr op   151    3e-36 
    gi|115950|sp|P25144|CCPA_BACSU  Catabolite control protein A (...   148    3e-35 
    gi|3024530|sp|Q45831|REGA_CLOSA  HTH-type transcriptional regulat   147    6e-35 
    gi|37999777|sp|Q9CPA2|RBSR_PASMU  Ribose operon repressor           142    1e-33 
    gi|3023459|sp|Q56194|CCPA_STAXY  Probable catabolite control prot   135    2e-31 
    gi|26007033|sp|Q54430|SCRR_STRMU  Sucrose operon repressor (Scr o   135    2e-31 
    gi|18202290|sp|P58258|REGA_CLOAB  HTH-type transcriptional regula   133    7e-31 
    gi|1168844|sp|P46828|CCPA_BACME  Glucose-resistance amylase re...   132    1e-30 
    gi|585043|sp|P37947|DEGA_BACSU  HTH-type transcriptional regulato   131    2e-30 
    gi|82581649|sp|P0ACP0|CYTR_SHIFL  HTH-type transcriptional rep...   130    4e-30 
    gi|38604814|sp|Q8CNV8|CCPA_STAES  Probable catabolite control ...   130    4e-30 
    gi|1172870|sp|P44329|RBSR_HAEIN  Ribose operon repressor            130    6e-30 
    gi|82582997|sp|P0ACQ3|RBSR_SHIFL  Ribose operon repressor >gi|...   127    5e-29 
    gi|82582278|sp|P0ACP9|PURR_SHIFL  HTH-type transcriptional rep...   125    1e-28 
    gi|7388031|sp|O68446|PURR_SALTY  HTH-type transcriptional repr...   125    2e-28 
    gi|119334|sp|P27871|ENDR_PAEPO  Probable HTH-type transcriptional   125    2e-28                                                                                  
    
    Мы видим, что в списке 5 ортологов: 3 в начале списка и 2 далее, но есть и белки, имеющие схожие функции. То есть для поиска ортологов не вполне подходит.


    ©Шишова Анна